lBuxG实验一显微镜的构造原理及使用.ppt
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1、细胞生物学实验细胞生物学实验刘小红刘小红电话:电话:13330761109QQ:350783409Email: 生命科学学科院生命科学学科院 生物技术教研室生物技术教研室实验安排实验安排实验一、显微镜的构造原理及使用方法实验一、显微镜的构造原理及使用方法实验二、细胞凝集现象的观察实验二、细胞凝集现象的观察实验三、细胞膜的渗透性实验三、细胞膜的渗透性实验四、叶绿体的分离及荧光现象的观察实验四、叶绿体的分离及荧光现象的观察实验五、线粒体的分离及观察实验五、线粒体的分离及观察实验六、实验六、DNA的的Fulgen染色法染色法实验七、植物细胞骨架的观察实验七、植物细胞骨架的观察实验八、实验八、RNA的
2、的Brachet反应反应 实验九、植物的组织培养实验九、植物的组织培养实验一实验一 显微镜的构造原理显微镜的构造原理及使用方法及使用方法一、普通光学显微镜二、常见特殊显微镜三、电子显微镜一、普通光学显微镜一、普通光学显微镜Ordinary optical microscope(一)(一)基本构造基本构造(二)(二)放大原理及光路图放大原理及光路图(三)(三)性能和质量性能和质量(四)(四)使用方法使用方法(五)(五)使用注意事项使用注意事项1、机械部分(1)镜座(2)镜柱(3)镜臂(4)镜筒(5)转换器(6)载物台(7)调节器2、照明部分(1)反光镜(2)聚光器(3)光圈 3、光学部分(1)目
3、镜(5,10, 15)(2)物镜( 低:10或 15;高:40或 45;油 :100)(一)基本构造(一)基本构造普通显微镜的结构示意图(左:单目;右:双目)1、 目镜; 2、镜筒;3、物镜转换器;4、物镜;5、通光孔;6、聚光器;7、光圈;8、反光镜;9、粗调节器;10;细调节器;11、镜臂;12、移片器;13、载物台;14、倾斜关节;15、镜柱;16、镜座;17、 标本移动器螺旋;18、灯室 细胞中期图片细胞中期图片左:低倍镜;右:高倍镜左:低倍镜;右:高倍镜(二)放大原理及光路图(二)放大原理及光路图(二)放大原理及光路图(二)放大原理及光路图(三)性能和质量1、分辨率(、分辨率(res
4、olution) 指能分辨出的相邻两个点间最小距离的能力。指能分辨出的相邻两个点间最小距离的能力。r = 0.61 / (n sin) r:分辨力;:分辨力; :照明光源的波长;:照明光源的波长; n:介质的折射率;:介质的折射率; :样品对物镜孔径角的半角;:样品对物镜孔径角的半角; 0.61:恒定的参数。:恒定的参数。注:注:n sin的量称为物镜的数值孔径,缩写为的量称为物镜的数值孔径,缩写为NA;r越小,则越小,则分辨率越高。要增大数值孔径,孔径角无法增大,只能增大分辨率越高。要增大数值孔径,孔径角无法增大,只能增大介质的折高压率,这样就诞生了水浸物镜和油浸物镜,目前介质的折高压率,这
5、样就诞生了水浸物镜和油浸物镜,目前最大最大NA值可达值可达1.4。透镜的焦距透镜的焦距透镜的角孔径透镜的角孔径2、放大率(、放大率(magnification)指最终成像的大小与原物体大小的比值。指最终成像的大小与原物体大小的比值。总放大率总放大率 = 物镜放大倍数物镜放大倍数 目镜放大倍数目镜放大倍数空气介质:可达空气介质:可达1000倍倍油介质(通常是香柏油):可达油介质(通常是香柏油):可达1400倍倍分辨本领分辨本领光源光源透镜透镜是否需真空是否需真空光学显微镜光学显微镜300 nm可见光可见光玻璃透镜玻璃透镜否否200 nm (油)油)可见光可见光玻璃透镜玻璃透镜否否100 nm紫外
6、光紫外光石英透镜石英透镜否否电子显微镜电子显微镜0.1 nm电子束电子束电磁透镜电磁透镜是是电子显微镜和光学显微镜的基本区别电子显微镜和光学显微镜的基本区别(四)使用方法(四)使用方法1、用前的准备工作、用前的准备工作(1)取显微镜;()取显微镜;(2)完好性检查)完好性检查2、低倍镜的使用、低倍镜的使用(1)准备;()准备;(2)对光;()对光;(3)放标本片)放标本片(4)调节焦距)调节焦距3、高倍镜的使用、高倍镜的使用4、油镜的使用方法、油镜的使用方法5、使用练习、使用练习(五)使用注意事项(五)使用注意事项1 1、持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势,不可单手提取,以免零件脱落或碰撞到
7、、持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势,不可单手提取,以免零件脱落或碰撞到其它地方。其它地方。 2 2、轻拿轻放,不可把显微镜放置在实验台的边缘,应放在距边缘、轻拿轻放,不可把显微镜放置在实验台的边缘,应放在距边缘10cm10cm处,以免碰翻落处,以免碰翻落地。地。3 3、观察有液体的临时标本时要加盖片,以免液体污染镜头和显微镜。、观察有液体的临时标本时要加盖片,以免液体污染镜头和显微镜。4 4、粗、细调节钮要配合使用,不能过度调节,调时侧面注视镜筒下降,以免压坏标本、粗、细调节钮要配合使用,不能过度调节,调时侧面注视镜筒下降,以免压坏标本和镜头。和镜头。5 5、保持显微镜的清洁,光学和照明部
8、分只能用擦镜纸擦拭,切忌口吹手抹或用布擦,、保持显微镜的清洁,光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭,切忌口吹手抹或用布擦,机械部分用布擦拭。机械部分用布擦拭。6 6、水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台,如果沾污应立即用擦镜纸擦净。、水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台,如果沾污应立即用擦镜纸擦净。7 7、放置玻片标本时要对准通光孔中央,且不能反放玻片,防止压坏玻片或碰坏物镜。、放置玻片标本时要对准通光孔中央,且不能反放玻片,防止压坏玻片或碰坏物镜。8 8、要养成两眼同时睁开观察的习惯,以左眼观察视野,右眼用以绘图。、要养成两眼同时睁开观察的习惯,以左眼观察视野,右眼用以绘图。9 9、不要随意取
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