动物细胞培养生物反应器及专用微载体.ppt
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1、动物细胞培养生物反应器及专用微载体广州大学生命科学学院 柯德森为什么要进行动物细胞培养?动物细胞的特点、培养条件及存在问题动物细胞培养方式动物细胞培养的操作方式动物细胞培养生物反应器动物细胞反应器的控制动物细胞培养专用微载体内容提要内容提要动物细胞培养 细胞培养是指离体细胞在无菌条件下分裂、生长 ,在整个培养过程中不出现分化,不再形成组织。动物细胞培养的意义动物细胞培养对生产生物工程产品,特别是功能蛋白质方面具有明显的优势:1)同源性:直接进行翻译后加工,蛋白质可直接折叠成正确的构象翻译后修饰糖基化,与天然产品一致。2)有利于产品的分离纯化:分泌胞外、纯化方便动物细胞培养的意义医药卫生领域生物
2、工程生物制药领域羊水细胞培养羊水细胞培养 羊水细胞培养是培养羊水内脱落的胎儿细胞,做成染色体核型分析,用于诊断胎儿染色体病及胎儿畸形,是一种科学的、结果可靠的、安全的产前诊断法。 常用于生物工程及制药行业的动常用于生物工程及制药行业的动物细胞体系物细胞体系 W1-38W1-38W1-38W1-38:正常胚肺组织人二倍体正常胚肺组织人二倍体正常胚肺组织人二倍体正常胚肺组织人二倍体 细胞系。细胞系。细胞系。细胞系。 核型为核型为核型为核型为2n=462n=46。成纤维细胞,。成纤维细胞,。成纤维细胞,。成纤维细胞, 能产生胶原,培养基用能产生胶原,培养基用能产生胶原,培养基用能产生胶原,培养基用B
3、ME BME (Eagle Basal mediumEagle Basal medium)。)。)。)。10%小牛血清,小牛血清,pH7.2,同工酶为同工酶为G6PD B型。型。倍增时间为倍增时间为24h,有限寿命有限寿命50代。代。安全,安全,用于制备疫苗。用于制备疫苗。 MRC-5MRC-5MRC-5MRC-5:从正常男性肺组织从正常男性肺组织从正常男性肺组织从正常男性肺组织 中获得的人二倍体细胞系。中获得的人二倍体细胞系。中获得的人二倍体细胞系。中获得的人二倍体细胞系。 核型为核型为核型为核型为2n=462n=46。 属成纤维细胞。属成纤维细胞。属成纤维细胞。属成纤维细胞。 培养基用加小
4、牛血清。培养基用加小牛血清。培养基用加小牛血清。培养基用加小牛血清。 同工酶同工酶同工酶同工酶G6PD BG6PD B型。型。型。型。 有限寿命有限寿命4246代。增殖代。增殖 速度较速度较W1-38快,对不良快,对不良 环境敏感性较环境敏感性较W1-38低。低。 对人的病毒敏感。对人的病毒敏感。 用于生产疫苗。用于生产疫苗。 BHK-21:BHK-21:BHK-21:BHK-21:从从从从5 5 5 5只无性别的生长只无性别的生长只无性别的生长只无性别的生长1 1 1 1天的地天的地天的地天的地鼠幼鼠肾脏中分离的鼠幼鼠肾脏中分离的鼠幼鼠肾脏中分离的鼠幼鼠肾脏中分离的; ; ; ;成纤维样细胞
5、成纤维样细胞成纤维样细胞成纤维样细胞, , , ,核型为核型为核型为核型为2n=44;2n=44;2n=44;2n=44;培养基为培养基为培养基为培养基为DMEMDMEMDMEMDMEM加加加加7%7%7%7%胎牛胎牛胎牛胎牛血清。血清。血清。血清。用于增殖病毒,包括多瘤病毒、用于增殖病毒,包括多瘤病毒、用于增殖病毒,包括多瘤病毒、用于增殖病毒,包括多瘤病毒、口蹄疫病毒、狂犬病毒等并制作疫苗,口蹄疫病毒、狂犬病毒等并制作疫苗,口蹄疫病毒、狂犬病毒等并制作疫苗,口蹄疫病毒、狂犬病毒等并制作疫苗,现已用于工程细胞构建。现已用于工程细胞构建。现已用于工程细胞构建。现已用于工程细胞构建。 VeroVe
6、roVeroVero:从正常成年非洲绿猴从正常成年非洲绿猴从正常成年非洲绿猴从正常成年非洲绿猴 肾脏分离的。肾脏分离的。肾脏分离的。肾脏分离的。 为贴壁依赖的成纤维细胞,为贴壁依赖的成纤维细胞,为贴壁依赖的成纤维细胞,为贴壁依赖的成纤维细胞, 核型核型核型核型2n=602n=602n=602n=60; 培养基为培养基为199199培养基,培养基, 加加5%5%胎牛血清;胎牛血清;用于增殖病毒,用于增殖病毒, 包括多瘤病毒、脊髓灰质炎、包括多瘤病毒、脊髓灰质炎、 狂犬病毒。狂犬病毒。 NamalwaNamalwaNamalwaNamalwa:从肯尼亚患有淋巴瘤病从肯尼亚患有淋巴瘤病从肯尼亚患有淋
7、巴瘤病从肯尼亚患有淋巴瘤病 人获取,建成的人的类淋巴母细胞。人获取,建成的人的类淋巴母细胞。人获取,建成的人的类淋巴母细胞。人获取,建成的人的类淋巴母细胞。2.8%2.8%2.8%2.8%的高倍体率,的高倍体率,的高倍体率,的高倍体率,1212121214141414条标记染条标记染条标记染条标记染 色体。单条色体。单条色体。单条色体。单条X X X X,无,无,无,无Y Y Y Y。培养基为。培养基为。培养基为。培养基为RPMI RPMI RPMI RPMI 1640164016401640,添加,添加,添加,添加7%7%7%7%胎牛血清。胎牛血清。胎牛血清。胎牛血清。用于生产用于生产用于生
8、产用于生产 干扰素。干扰素。干扰素。干扰素。 SP2/0-Ag14SP2/0-Ag14SP2/0-Ag14SP2/0-Ag14:通过融合的方法,通过融合的方法,通过融合的方法,通过融合的方法, 从有羊抗红细胞活性的从有羊抗红细胞活性的从有羊抗红细胞活性的从有羊抗红细胞活性的BALB/cBALB/cBALB/cBALB/c 小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞系小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞系小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞系小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞系 P3X63Ag8P3X63Ag8P3X63Ag8P3X63Ag8融合杂交瘤融合杂交瘤融合杂交瘤融合杂交瘤SP2/NL-Ag SP2/NL-Ag SP2/NL-Ag SP2
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