动物细胞培养和核移植技术.ppt
《动物细胞培养和核移植技术.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《动物细胞培养和核移植技术.ppt(40页珍藏版)》请在启牛文库网上搜索。
1、2.2 动物细胞工程动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段:动物细胞工程常用的技术手段:动物细胞培养技术、动物细胞培养技术、 动物细胞核移植技术、动物细胞核移植技术、动物细胞融合技术、动物细胞融合技术、 生产单克隆抗体技术生产单克隆抗体技术提问:提问:v植物细胞工程常用的技术手段有哪些?植物细胞工程常用的技术手段有哪些?植物组织培养技术、植物组织培养技术、 植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术动物细胞培养技术动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。是其他动物细胞工程技术的基础。2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一、动物细胞培养一、动物细胞培养v概念概念:就是从动
2、物机体中取出相关的组就是从动物机体中取出相关的组织织,将它分散成单个细胞,然后将它分散成单个细胞,然后,放在适放在适宜的培养基中宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。让这些细胞生长和增殖。植物组织培养植物组织培养 在无菌和人工控制的条件下在无菌和人工控制的条件下, ,将离体的植将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工控制的培物器官、组织、细胞,培养在人工控制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。一、动物细胞培养一、动物细胞培养选材:选材: 动物胚胎或幼龄动物的组织、动物胚胎或幼龄动物
3、的组织、器官,它们细胞增殖能力强,分裂旺盛,器官,它们细胞增殖能力强,分裂旺盛,分化程度低,容易培养。分化程度低,容易培养。v在进行动物细胞培养时,用在进行动物细胞培养时,用胰蛋白酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶或胶原蛋白酶分散细胞,说明细胞间的分散细胞,说明细胞间的物质主要是物质主要是蛋白质蛋白质。动物细胞培养适宜。动物细胞培养适宜的的pH为为7.27.4,此环境下胃蛋白酶,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。的活性较高。分散成单个细胞分散成单个细胞v细胞贴壁:细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁
4、上,称为细胞贴壁。称为细胞贴壁。 要求:要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。易于贴附。 细胞的接触抑制:细胞的接触抑制: 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。的接触抑制。 动物细胞生长特性:动物细胞生长特性:一、动物细胞培养一、动物细胞培养动物机体组织动物机体组织单个细胞单个细胞原代培养原代培养胰胰蛋蛋白白酶酶胶胶原原蛋蛋白白酶酶稀稀释释分分装装传代培养传代培养培养过程:培养过程:原代培养原代培养培养过程:培养过程:动物胚胎
5、或幼龄动动物胚胎或幼龄动物的组织、器官物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代细胞代细胞原代培养原代培养50代细胞代细胞传代培养传代培养细胞株细胞株无限传代无限传代细胞系细胞系单个细胞单个细胞加加培养液培养液遗传物质遗传物质未改变未改变遗传物质遗传物质已改变已改变动物组织细胞间隙中动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织定弹性和韧性的组织和器官。和器官。(分解弹性纤维)(分解弹性纤维)动物细胞培养不能动物细胞培养不能最终培养成生物体最终培养成生物体1、植物组织培养过程将组织分
6、散成单个细胞、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗?的吗?、动物细胞培养过程将组织分散成单个细、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗?胞的吗?、为何动物细胞培养过程将组织分散成单、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢?个细胞的呢?、如何将动物组织分散成单个的细胞呢?、如何将动物组织分散成单个的细胞呢?没有没有是是 成块的组织细胞靠在一起成块的组织细胞靠在一起,彼此彼此限制了细胞的生长和增殖限制了细胞的生长和增殖先用剪刀剪碎先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理。后用蛋白酶处理。思考题思考题、细胞膜的主要成份是什么?、细胞膜的主要成份是什么?、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?、胰蛋白酶能将细胞消
7、化掉吗?、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉,那将动、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉,那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢?物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢?蛋白质和磷脂蛋白质和磷脂能能注意时间的控制注意时间的控制思考题思考题、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份?细胞间的物质是什么成份?胰蛋白酶水解蛋白质胰蛋白酶水解蛋白质细胞间的成份是蛋白质细胞间的成份是蛋白质、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?为什么?、动物细胞培养取材时,一般是取胚胎组、动物细胞培养取材时,一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官,请
8、解释原因?织或幼龄动物的组织或器官,请解释原因?不能,因为两者的最适不能,因为两者的最适pH不同,而正常不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适pH较接近较接近胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛增殖旺盛思考题思考题11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒?无毒?12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖?再分裂、增殖?13、如此时细胞数量并未达到人们的需求,、如此时细胞数量并未达到人们的需求,应该怎样办?应该怎样办?易于培养细胞贴壁,
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 动物 细胞培养 移植 技术