动物实验设计结果分析和解释.ppt
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1、动物实验设计、结果分析和解释 For scientific, ethical and economic reasons, it is important to design animal experiments well, to analyze the data correctly, and to use the minimum number of animals necessary to achieve the scientific objectives 一般来说,动物实验的研究工作应该明确描述:研究的目的和/或者需要验证的假说。选择特定动物模型的原因。动物种、品系、来源和类型。每个独立实验
2、步骤的详细描述,包括研究设计和使用动物数量。数据分析所用的统计学方法。一、动物实验的分类1、确证性的实验:用一种最大可能,正确解答问题的系统方法,收集有关处理实施后动物反应的科学数据。2、探索性的实验:为产生新的假说提供素材。这两类实验都涉及在实验人员的控制下,对动物施加一定的处理或操作,来发现是否处理在实验对象上引起一定的反应,或者对这种反应进行定量。3、检验性实验:是观察性的实验,用于发现科研人员不能控制的变量之间的联系。这种联系可能是暂时的也可能是长期的。实验设计的主要目的一是保证所测变量的任何差异是由处理造成的,而不是其他非对照变量引起;另一个目的是通过控制确定的变量在尽可能小的范围内
3、,减少所测反应的变异性,这样对处理效应的评介更准确。二、差异的分类和控制1、实验者带来的差异 实验者带给实验的差异主要有两种。一是,与正确恰当的实验操作有关,如:注射、灌胃口服、外科手术等;二是,缺乏准确的测量手段。 对第一种原因产生的差异,其控制应以确保实验过程和操作的一致性、准确性和完整性为目的。对第二种原因产生的差异,其控制的主要方法就是对观测数据进行多次测量。例子:动物注射给药 动物的抓取固定操作 外科手术不准确的测量测量仪器本身的不准确观察的不准确GLP是1970s FDA制定的实验操作标准,保证用于药品登记的实验数据可信准确。这种基于通过工作质量的保证实现实验数据信息可信准确的思想
4、,为全球公认接受。GLP观念的引入明显减少了科学研究工作中测量方法产生的差异。2、动物带来的差异1)动物的来源的差异2)动物饲养管理的差异3)生活在不同的环境4)健康状况不同5)动物之间相互作用引起 的差异1)动物来源的差别 由于遗传漂变可能来源于不同供货商的动物存在遗传学的差异,随后由于饲养的环境方面的差异造成表型上的差异。 加之,目前还没有两个供货商是采用完全一样的饲养管理程序或完全一样的饲养环境。而动物在产后的发育阶段是行为类型发育的敏感期,决定成年后保持行为类型和社会相互关系。因此有必要把动物来源的因素考虑到实验的设计中,并采用适当的控制手段检查是否还应延长时间让动物适应实验环境。2)
5、动物饲养管理的差别动物饲养管理方面的微小变化会对动物的行为、生化和生理产生就巨大的影响。如,在其他环境条件恒定不变的情况下,只改变饲养人员就可使小鼠的繁殖性能显著下降。猜想这些影响群体性能的原因与视觉、听觉或嗅觉有关。因此明智的做法是保证动物在新的环境和更换饲养人员的情况下,至少让动物适应调整1周,才能开始实验。3)生活在不同的环境动物对其生活的环境是敏感的,一个微小的变化都可以影响到它们的行为和生理学。这里我们强调的是动物所占据的空间微环境的差别。例如,与进风口和排气口的相对位置不同、垂直位置不同,会造成物理、化学和微生物组成的空间差异。这些情况我们在进行实验设计时也应加以考虑。4)动物健康
6、状况临床疾病会引起明显的疾病症状,患病的动物是不能用来做实验的。而亚临床疾病不表现出疾病症状,不容易判断它是否存在。它主要的影响有二。一是,疾病可能影响特定的器官,抑制它们的功能,改变动物的生理和生化状态。如果这一功能是实验过程的测定结果时,那么实验结果很可能产生偏差。二是,亚疾病从广义上讲,对动物的健康造成不利影响,使动物对研究的操作影响变得敏感。感染带来的更大问题是疾病的严重程度根据动物的体质而变化,因此在实验的整个动物群体中差别被加大。5)动物之间相互作用引起的差异A、动物是群居还是独居要根据动物种属的行为学特性而定。实验前应了解所使用动物对群居的忍耐方式的不同,如,地鼠是独居动物,在实
7、验条件下不适合群居生活;而小鼠的大多数品系独居是一种应激情形。3-5只小鼠最佳,或独居的动物给予一定的丰富生活的物品(遮掩物和玩具)可降低应激情形。B、动物社会阶层的建立,会影响到实验的数据的差异。另外还要考虑动物建立社会等级的过程中,存在相当高的侵略性,群体中因而引起持续的应激和明显影响动物行为学、生理学和生化特征的情况。实验前将动物分组群居时,让动物等级社会完全建立稳定再进行实验处理是十分必要的。人员培训的重要性1)了解动物饲养管理的基本知识。2)规范操作减少动物紧张和痛苦水平。3)随机化的处理安排减少处理动物对随后动物处理的困难和带来实验数据差异。一个有效减少由于不专业操作带来的结果差异
8、的方法是在单位建立专业化的中心设施和部门,由专业化的操作能手代替研究者进行操作。SHEFFIELD大学进行小鼠免疫的例子。三、实验设计的步骤1、开始阶段1)文献查阅2)科研方法3)陈述问题预期可能的结果4)动物模型的确定5)实验人员的确定1)文献查阅查阅的文献应广泛包括现在和过去的杂志以及网络上的信息资源,如,MEDLINE、TOXLINE、PUBMED、NCBI等,目的是了解清楚你所研究的焦点问题都已知道些什么,明确所用的方法、动物模型,排除不必要的重复研究。也是为IACUC审查提供项目不是重复研究、替代动物实验的方法不可行、可能引起动物疼痛的操作已得到评估认可的证据。2)科研方法1 观察和
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