实验六小鼠骨髓细胞染色体标本的制备多角度.ppt
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1、实验六 小鼠骨髓细胞染色体标本的制备,杭州师范大学 刘姬艳,一、实验目的,通过小白鼠骨髓细胞染色体的制备,初 步掌握低渗法制备动物骨髓细胞染色体 的方法2.熟悉染色体的形态、种类及小白鼠等动 物染色体的数目及特点,二、实验原理,骨髓细胞是具有旺盛分裂能力的细胞,从这些分裂细胞中,可观察到处于分裂中期的染色体,能对一种动物染色体的形态特征、数目进行准确的观察和分析。由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞的原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。,首先,为了获
2、得较多的中期分裂相骨髓细胞,必须给动物注射一定剂量的秋水仙素。秋水仙素对分裂期纺锤丝的形成具有破坏作用,当动物被注射适量的秋水仙素后,处于分裂增殖中的骨髓细胞由于纺锤丝不能形成,中期染色体不能正常趋向两极,因而大量的细胞处于观察染色体形态最佳的分裂中期。其次,为了能够清楚的观察染色体的形态,取出的骨髓细胞要经过低渗(KCl溶液)处理使细胞膨胀、染色体适当的分散。固定(甲醇:冰醋酸)使染色体保持完好的形态。染色(Giemsa液)使染色体易分辨、观察。,二、实验原理(continued),1.材料:小白鼠2.试剂:0.01秋水仙素,0.4%氯化钾(KCl),Carnoy固定液(甲醇:冰醋酸=3:1
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