实验三兔抗SRBC免疫血清的鉴定多角度.ppt
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1、实验三兔抗SRBC免疫血清的鉴定,实验目的:掌握兔抗SRBC免疫血清鉴定的原理 熟悉鉴定方法的操作及结果判定,实验原理:若SRBC与其免疫血清相遇,出现肉眼可见的凝集块(凝集阳性),说明免疫血清中含有特异性抗SRBC抗体。当SRBC在试管中与相应的抗体结合后,在补体的作用下,将导致SRBC裂解,发生免疫溶血。反应体系中的SRBC和补体一定时,其溶血程度与免疫血清中抗体的效价呈正比,籍此可通过补体溶血试验测定抗体(溶血素)的效价。,实验材料:免疫血清(实验二制备的抗血清)做1:100稀释 1SRBC悬液 补体(豚鼠新鲜血清)做1:30稀释 生理盐水 无菌试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、玻片,实验
2、步骤:1、玻片凝集试验鉴定免疫血清中有无抗体 取一张玻片。在两边分别加生理盐水和免疫血清各一滴,然后各加一滴SRBC悬液,轻摇(或轻吹)玻片混匀,放置12min,若生理盐水侧均匀混浊,而免疫血清侧红细胞凝集成团,出现小颗粒,即为凝集试验阳性,说明免疫血清中有抗羊红细胞抗体。,生理盐水+SRBC 抗血清+SRBC,第1管生理盐水0.5ml溶血素0.25ml(1:100),第2管生理盐水0.75ml溶血素0.25ml(1:100),第3管生理盐水1ml溶血素0.25ml(1:100),1:400 1:800 1:1600 1:3200 1:6400 1:12800,1:500 1:1000 1:2
3、000 1:4000 1:8000 1:16000,2、补体溶血试验测免疫血清的效价,1:300 1:600 1:1200 1:2400 1:4800 1:9600,第4-18管加生理盐水0.25ml 19号为阴性对照,(1)溶血素稀释,0.5ml,0.75ml,(2)按下表在上述1-19号管中加入下列成分,阴性对照,结果判定:以呈现完全溶血的最高稀释度为效价。实验结果:观察并判定各自小组的效价。,结果判定:观察溶血现象,以呈现完全溶血的血清最高 稀释度为溶血素效价。溶血现象:完全溶血清凉透明 不溶血混浊不透明 试验结果:记录每个试管中的溶血情况;写出溶血素的效价。思考题:兔抗SRBC免疫血清的鉴定为什么采用玻片法?,
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