人感染猪链球菌病样品采集运送与实验室检测方案ppt课件.ppt
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1、人 感 染 猪 链 球 菌 病样品采集运送与实验室检测方案浙江省丽水市人感染链球菌病疫情控制和诊疗技术培训会议 丽水市CDC 兰进权 提纲病原学简介样品采集与运送实验室检测病原学简介分类培养特性生化特征致病因子链球菌分类伯杰分类6 6大类群,大类群,2929个种个种16SrRNA序列同源性和化学分类链球菌属分类学定义无芽孢革兰氏阳性细菌,细胞形态为球形或球无芽孢革兰氏阳性细菌,细胞形态为球形或球杆状,直径杆状,直径0.50.52.02.0微米,细胞成对或成链排微米,细胞成对或成链排列,有些种具有荚膜。列,有些种具有荚膜。链球菌分类根据溶血现象分类根据溶血现象分类 甲型溶血性链球菌:称甲型溶血或
2、甲型溶血性链球菌:称甲型溶血或 溶血,溶血, 溶血溶血环中的红细胞并未完全溶解。多为条件致病菌。环中的红细胞并未完全溶解。多为条件致病菌。 乙型溶血性链球菌:称乙型溶血或乙型溶血性链球菌:称乙型溶血或 溶血,溶血, 溶血溶血环中的红细胞完全溶解,致病力强环中的红细胞完全溶解,致病力强 丙型链球菌:无溶血环,一般不致病丙型链球菌:无溶血环,一般不致病猪链球菌猪链球菌 溶血溶血( (偶而也有弱偶而也有弱 溶血或溶血或 溶血、溶血、 溶血现象均不明显溶血现象均不明显 ) ) ,某些菌株在马血培养,某些菌株在马血培养基上基上 溶血溶血链球菌分类根据抗原结构的分类根据抗原结构的分类 兰氏分类:兰氏分类:
3、按按多糖类抗原(多糖类抗原(C C抗原)将链球菌抗原)将链球菌分成分成A A、B B、C C、D D、E E、F F、G G、H H、K K、L L、MM、N N、O O、P P、Q Q、R R、S S和和T T群群( (其中缺其中缺I I、J J群群) ) ,近年又增加,近年又增加U U、V V群,共群,共2020群,每个群有群,每个群有1 1个或多个种。个或多个种。几乎所有群的菌株,都能从病猪体内分离得到,几乎所有群的菌株,都能从病猪体内分离得到,引起猪病并偶尔经伤口感染人的链球菌主要有引起猪病并偶尔经伤口感染人的链球菌主要有 R R群的群的2 2型猪链球菌型猪链球菌 S S群和群和D D
4、群的群的1 1型猪链球菌型猪链球菌 F F群的咽峡炎链球菌群的咽峡炎链球菌 L L、S S、T T、U U、V V群链球菌等群链球菌等链球菌分类猪链球菌血清2型兰氏分类:兰氏分类:R R群群根据菌体荚膜抗原特性不同,分为根据菌体荚膜抗原特性不同,分为3535个血清个血清型:型:1/21/2,1 13434型型致病性最强的是致病性最强的是2 2型,其次为型,其次为1 1型型2型猪链球菌19541954年英国分离年英国分离19681968年命名为荚膜年命名为荚膜II II型猪链球菌型猪链球菌分为致病力不同的株分为致病力不同的株猪链球菌培养特性革兰氏阳性无芽胞球菌,兼性厌氧营养要求较高,在普通培养基
5、中生长不良,需补充血液、血清、葡萄糖等在血清肉汤中易形成长链,管底呈絮状沉淀在绵羊鲜血琼脂平板上37 培养培养2424小时,形成小时,形成直径l2毫米的细小菌落,灰白色,半透明,边缘整齐,凸起,光滑,溶血(有时呈弱溶血或溶血不明显),48小时后可有草绿色色素沉着。 猪链球菌培养特性刚分离的猪链球菌,典型的革兰氏阳性链球菌,链长达二十多个二代培养后细菌形态不典型,结晶紫作色不良,多为不成链球杆菌,少数呈短链状。链球菌链球菌. Gram stain. CDC/Dr. Richard Facklam 链球菌链球菌 猪链球菌培养特性10培养不生长,45培养生长,6030分钟试验不生长5530分钟即可被
6、杀死 猪链球菌生化特征猪链球菌生化特性往往差异较大,一般难以作为分类依据触酶试验阴性水解七叶苷、淀粉和精氨酸,不水解马尿酸盐和明胶分解乳糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露糖,不分解阿拉伯糖、鼠李糖和甘露醇致病因子猪链球菌猪链球菌2 2型主要型主要致病因子致病因子 溶菌酶释放蛋白(溶菌酶释放蛋白(muramidasemuramidase-released -released protein,MRPprotein,MRP) 细胞外因子(细胞外因子(extracellularextracellular factor,EF factor,EF) 猪溶素(猪溶素(suilysinsuilysin) 荚荚膜多
7、糖膜多糖用南通地区分离的人源猪链球菌对兔和小白鼠的用南通地区分离的人源猪链球菌对兔和小白鼠的攻击试验表明,猪链可使家兔发病,并引起死亡。攻击试验表明,猪链可使家兔发病,并引起死亡。而小白鼠不敏感而小白鼠不敏感样品采集与运送采样器材样品种类血液和脑脊液标本采集方法样品运输保存注意事项采样器材 无菌封闭性好的试管,最好使用负压采血管或带螺口盖的塑料管,避免使用玻璃试管。可以清楚标记且标记不易脱落的记号笔。可以方便采集组织标本的无菌容器。无菌的剪刀、镊子和手术刀。采样器材 血平皿(或者血培养瓶)。一次性隔离服、乳胶手套、防护口罩等带有冰袋或者冰排的安全可靠的保温运输容器采样送检单样品种类 现症病人不
8、抗凝全血现症病人抗凝血发病47天、1016天不抗凝血脑脊液标本尸体解剖应无菌采集肝、脾、心血、胸(腹)水如有病死猪也可进行解剖,取肝、脾、肾、心血、肉 血液和脑脊液标本采集方法 无菌抽取血液510ml分置于有抗凝剂和无抗凝剂的无菌试管或者负压采血管中按常规方法腰穿采集适量脑脊液标本置于无菌试管中采集标本的同时接种血平皿或者血培养瓶,置于3537培养样品运输保存 所有的原始标本在转运过程中应置于安全可靠容器中。标本应冷藏运输。需要马上检测的标本在实验室可暂放4-8冰箱。剩余标本放置于-70保存。 注意事项 严格严格无菌操作无菌操作,防止标本污染。,防止标本污染。用于分离培养的标本应在用于分离培养
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