中学生物优质公开课课件------动物细胞融合和单克隆抗体.ppt
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1、1 1、定义:、定义:指用自然或人工方指用自然或人工方法使两个或多个不同的细胞法使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。融合成一个细胞的过程。一、动物细胞融合一、动物细胞融合细胞杂交:细胞杂交:不同基因型的细不同基因型的细胞之间的融合就是胞之间的融合就是细胞杂交细胞杂交。杂交细胞:杂交细胞:融合后形成的具融合后形成的具有原来有原来两个或多个细胞遗传两个或多个细胞遗传信息信息的的单核细胞单核细胞成为杂交细成为杂交细胞胞。 细胞融合是正常的生命活动细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合两个细胞正在融合 受精作用受精作用 二二二二. .动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合2、诱导融
2、合的因素诱导融合的因素生物法:生物法:灭活的病毒灭活的病毒诱导融合诱导融合.(.(利用灭活仙台病毒是动物细胞融利用灭活仙台病毒是动物细胞融合所特有的。合所特有的。 这是由于病毒的磷脂这是由于病毒的磷脂外衣与动物细胞的膜十分相似的缘外衣与动物细胞的膜十分相似的缘故。病毒外壳上的某些糖蛋白可能故。病毒外壳上的某些糖蛋白可能还有促进细胞融合的功能。还有促进细胞融合的功能。) ) 化学法:化学法:聚乙二醇聚乙二醇PEGPEG诱导融诱导融合合. . 物理法:物理法:电激电激融合融合病毒颗粒黏病毒颗粒黏 附细胞表面附细胞表面细胞膜连接细胞膜连接细胞膜被细胞膜被 病毒颗粒穿通病毒颗粒穿通细胞融合、形成杂种细
3、胞细胞融合、形成杂种细胞3 3、动物细胞融合技术的应用、动物细胞融合技术的应用细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。利用杂交瘤技术,制备单克隆抗体。利用杂交瘤技术,制备单克隆抗体。思考讨论:思考讨论:为什么细胞融合过程中使用的为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活?不灭活行吗?病毒需要灭活?不灭活行吗? 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合,不灭质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合,不灭活的话会感染细胞,而不能诱导细胞融合。活的话会感
4、染细胞,而不能诱导细胞融合。总结:比较植物体细胞杂交和动物细胞融合总结:比较植物体细胞杂交和动物细胞融合比较项目比较项目比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合原原原原 理理理理融合前处理融合前处理融合前处理融合前处理诱诱诱诱 导导导导 方方方方 法法法法用用用用 途途途途细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、植物细胞的全能性植物细胞的全能性植物细胞的全能性植物细胞的全能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性用纤维素酶、用纤维素酶、用纤维素酶、用纤维素酶、果胶酶去壁果胶
5、酶去壁果胶酶去壁果胶酶去壁用胰蛋白酶用胰蛋白酶用胰蛋白酶用胰蛋白酶使细胞分散使细胞分散使细胞分散使细胞分散物理、化学方法物理、化学方法物理、化学方法物理、化学方法物理、化学、物理、化学、物理、化学、物理、化学、生物方法生物方法生物方法生物方法获得部分获得部分获得部分获得部分或完整植株或完整植株或完整植株或完整植株主要用于制备主要用于制备主要用于制备主要用于制备单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体人们获得抗体的传统方法是人们获得抗体的传统方法是? ?将抗原注入动物体将抗原注入动物体, ,然后从动物血清中提取抗体然后从动物血清中提取抗体这种方法的缺点是什么这种方法的缺点是什么? ?效率低,产量
6、有限,纯度低,动物抗体注入人体可能产生严重的过敏反应。效率低,产量有限,纯度低,动物抗体注入人体可能产生严重的过敏反应。运用已学知识,设想怎样获得单一类型的抗体?运用已学知识,设想怎样获得单一类型的抗体?能否用单个能否用单个B B淋巴细胞通过克隆形成的细胞群来产生单一类型的抗体呢?淋巴细胞通过克隆形成的细胞群来产生单一类型的抗体呢?B B淋巴细胞在体外不能无限增殖。淋巴细胞在体外不能无限增殖。二:动物细胞融合的成功应用二:动物细胞融合的成功应用二:动物细胞融合的成功应用二:动物细胞融合的成功应用 单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备思考思考单克隆抗体的制备单克隆抗体
7、的制备极富创造性的方案极富创造性的方案 将能够产生特定抗体的将能够产生特定抗体的B B淋巴细胞淋巴细胞和具有无限增殖能和具有无限增殖能力的力的骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞融合在一起,形成杂交瘤细胞。杂交融合在一起,形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体外快速生长,又能持续分泌成分单一瘤细胞既能在体外快速生长,又能持续分泌成分单一的特异性抗体。这种的特异性抗体。这种单一类型的只针对某一特定抗原单一类型的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子,就是单克隆抗体。决定簇的抗体分子,就是单克隆抗体。米尔斯坦米尔斯坦( (阿根廷阿根廷) )和科勒和科勒( (德国德国) )因此在因此在19841984年获诺贝年获诺贝尔奖。
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