食品微生物课件第四章食品中的细菌及其检测.ppt
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1、6/23/2022 1第四章第四章 食品中细菌及其大肠菌群的检测食品中细菌及其大肠菌群的检测食品中细菌菌落总数的测定食品中大肠菌群的测定6/23/2022 2第一节食品中菌落总数的测定第一节食品中菌落总数的测定6/23/2022 3一、一、菌落总数菌落总数GB/T 4789.2-2010: :食食品品检检样样经经过过处处理理,在在一一定定条条件件下下培培养养后后,所所得得每每mlml(或或每每g g)检检样样中中形成的微生物菌落总数。形成的微生物菌落总数。本标准规定的培养条件下所得结果,只包括一群在平板计数琼脂上生长发育的嗜中温需氧菌或兼性厌氧菌的菌落总数。 6/23/2022 4二、菌落总数
2、测定的意义二、菌落总数测定的意义1 1、判定食品被细菌污染的程度及卫生质量、判定食品被细菌污染的程度及卫生质量。2 2、预测食品存用的期限长短。、预测食品存用的期限长短。3 3、了解细菌在食品中的繁殖动态。、了解细菌在食品中的繁殖动态。6/23/2022 5三、菌落总数测定的方法三、菌落总数测定的方法 平板倾注法平板倾注法 平板表面涂布法平板表面涂布法6/23/2022 6四、平板倾注法测定菌落总数四、平板倾注法测定菌落总数检验步骤检验步骤(程序程序): 检样检样稀释处理稀释处理做平板做平板培养培养菌落计数菌落计数报告结果报告结果6/23/2022 7(一)、样品稀释及做平板(一)、样品稀释及
3、做平板1ml1ml1ml1ml1:101:10001:1001:100001ml1ml1ml加入营养琼脂加入营养琼脂1520ml25g样品样品生理盐生理盐水水6/23/2022 8 注意:注意:检样从开始稀释到倾注最检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过后一个平皿所用时间不宜超过20min。 6/23/2022 9对照对照空白对照:空白对照:不加样品,反映培养基中的不加样品,反映培养基中的杂质及污染情况杂质及污染情况稀释液对照稀释液对照:加:加1mL无菌稀释液,反映无菌稀释液,反映稀释液是否受到污染稀释液是否受到污染无菌操作对照:无菌操作对照:在空气中暴露在空气中暴露30min,反,
4、反映空气质量和操作技术映空气质量和操作技术6/23/2022 10(二)培养(二)培养普通食品普通食品: 37 48h , 倒置放平板倒置放平板水产品水产品: : 30 48h6/23/2022 11(三)计数和报告(三)计数和报告 到达规定培养时间,应立即到达规定培养时间,应立即计数。如果不能立即计数,应将计数。如果不能立即计数,应将平板放置于平板放置于0 044,但不得超过,但不得超过24h24h。6/23/2022 121、菌落的选择、菌落的选择(1 1)单个菌做一个菌落计)单个菌做一个菌落计(2 2)呈链状生长的菌落之间无任何明显界限,)呈链状生长的菌落之间无任何明显界限,作为一个菌落
5、计,如存在有几条不同来源的作为一个菌落计,如存在有几条不同来源的链,则每条链均应按一个菌落计算。链,则每条链均应按一个菌落计算。(3 3)如片状菌落不到平板一半,而另一半又)如片状菌落不到平板一半,而另一半又分布均匀,则可以半个平板的菌落数乘分布均匀,则可以半个平板的菌落数乘2 2代代表全平板的菌落数。表全平板的菌落数。6/23/2022 132、平板菌落计数的选择、平板菌落计数的选择 选取菌落数在选取菌落数在30300之间的平板之间的平板。(1 1)、)、若只有一个稀释度平板上的菌落数若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内:在适宜计数范围内: 计算两个平板菌落数的平均值,再将平计算两
6、个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应的稀释倍数,做为每克(毫均值乘以相应的稀释倍数,做为每克(毫升)的菌落总数结果。升)的菌落总数结果。6/23/2022 142、平板菌落计数的选择、平板菌落计数的选择2)若有两个连续稀释度的平板菌落在适宜范围:)若有两个连续稀释度的平板菌落在适宜范围: N=C/(n1+0.1n2)d 式中,式中, N 样品中菌落数样品中菌落数 C平板菌落数之和平板菌落数之和 n1第一个适宜稀释度第一个适宜稀释度平板数平板数 n2第二个适宜稀释度第二个适宜稀释度平板数平板数 d稀释因子(第一稀释度)稀释因子(第一稀释度)6/23/2022 15稀释度稀释度1:100(第一
7、稀释度)(第一稀释度)1:1000(第二稀释度)(第二稀释度)菌落数菌落数232,24433,35 例:例: N=C/(n1+0.1n2)d (2322443335)/2+(0.12) 10-2 544/2.2 10-2 24772=250006/23/2022 16 3 3)如均大于)如均大于300300,则取最高稀释度的平均菌,则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告落数乘以稀释倍数报告 4 4)如均小于)如均小于3030,则以最低稀释度的平均菌落,则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告数乘稀释倍数报告 5 5)如菌落数有的大于)如菌落数有的大于300300,有的又小于,有的又小于30
8、30,不在不在3030300300之间,以最接近之间,以最接近300300或或3030的平均菌的平均菌落数乘以稀释倍数报告落数乘以稀释倍数报告 6 6)如所有稀释度均无菌落生长,则应按小于)如所有稀释度均无菌落生长,则应按小于1 1乘以最低稀释倍数报告。乘以最低稀释倍数报告。 6/23/2022 176/23/2022 183、菌落数的报告1 1)菌落数在)菌落数在1100时,按实际数字报告;时,按实际数字报告;2 2)如大于或等于)如大于或等于100时,则报告前面两位有效数字,时,则报告前面两位有效数字,第三位数按四舍五入第三位数按四舍五入计算;计算;3 3)所有平板蔓延菌落无法计数,报告菌
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- 食品 微生物 课件 第四 中的 细菌 及其 检测