实验十临床模拟标本的细菌学检测多角度.ppt
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1、实验十 临床模拟标本的细菌学检测病原菌的检查程序病原菌的检查程序药物敏感试验直接涂片镜检分离培养生化试验血清学试验动物试验明明确确诊诊断断初步诊断初步诊断分子生物学技术其他检测技术常用染色方法 v革兰染色v抗酸染色 革兰染色 v试剂:结晶紫染液(初染剂);试剂:结晶紫染液(初染剂); 卢戈氏碘液(媒染剂);卢戈氏碘液(媒染剂); 95%95%乙醇溶液(脱色液);乙醇溶液(脱色液); 稀释石炭酸复红液(复染液)稀释石炭酸复红液(复染液)v染色步骤:初染染色步骤:初染 媒染媒染 脱色脱色 复染复染v染色结果:革兰阳性菌呈紫色或紫红色;染色结果:革兰阳性菌呈紫色或紫红色; 革兰阴性菌呈红色革兰阴性菌
2、呈红色 抗酸染色抗酸染色 v试剂:试剂: 石炭酸复红;石炭酸复红; 3%3%盐酸酒精;盐酸酒精; 碱性美蓝碱性美蓝v染色步骤:初染染色步骤:初染 脱色脱色 复染复染v染色结果:抗酸杆菌呈红色;染色结果:抗酸杆菌呈红色; 非抗酸杆菌呈蓝色非抗酸杆菌呈蓝色 常用培养基v增菌:血平板、巧克力平板、碱性胨水等v选择性:MAC、EMB、SS、HE等v鉴别:KIA、MIU等 菌落形态观察v形态特征: 大小、形状 表面、边缘 颜色、透明度 粘度 v溶血现象:溶血 、溶血 、溶血v色素 :脂溶性、水溶性v气味 纯菌落纯菌落 涂片染色,结合菌落形态涂片染色,结合菌落形态革兰阴性杆菌革兰阴性杆菌 革兰阳性球菌革兰
3、阳性球菌 氧化酶氧化酶 触酶触酶 - + + -肠杆菌科肠杆菌科 非发酵菌非发酵菌 葡萄球菌属葡萄球菌属 链球菌属链球菌属 常用生化试验v碳水化合物的代谢试验v蛋白质和氨基酸的代谢试验v碳源和氮源利用试验v各种酶类试验v抑菌试验 碳水化合物的代谢试验碳水化合物的代谢试验v糖(醇、苷)类发酵试验:能分解糖(醇、苷)类产酸时,培养基中的指示剂呈酸性反应;若能产气时,培养基可出现开裂气泡等现象;肠杆菌科尤为重要v氧化-发酵试验(O/F):肠杆菌科与非发酵菌的鉴别;葡萄球菌与微球菌的鉴别,前者为发酵型,后者为氧化型vONPG(半乳糖苷酶试验):主要用于迟缓发酵乳糖的细菌的快速鉴定,迅速及迟缓发酵乳糖的
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