1、 血清蛋白型血清蛋白型执教教师:XXX概概概概 述述述述血清的组成血清型概念血清型分类 特异性抗体分型:同种异型 电泳技术分型:电泳多态性法医学应用的血清蛋白型法医学应用的血清蛋白型Haptoglobin(Hp)Group-specific component(Gc)Transferrin(Tf)1-antitrypsin(1-AT)Immunoglobulin(Ig)Low-density lipoprotein(LDL),Component等 第一节 结合珠蛋白结合珠蛋白结合珠蛋白结合珠蛋白 HaptoglobinHaptoglobin,HPHP一、一、HPHP的分子结构的分子结构糖蛋白,
2、分子式()2 ,pI=4.1链有, 链无多态性HP1(83个氨基酸),第53位为Lys或Glu,构成HP1F和HP1S两条多肽链HP2(142个氨基酸),第53和112位上或Lys或Glu,构成2F,2S,2FS 三种不同的结构二、二、HPHP的生理功能的生理功能与血红蛋白Hb结合成Hp-Hb复合物,并很快被网状内皮系统所清除。还可以使Hb的过氧化酶活性增高。 三、三、HPHP的表现型及遗传的表现型及遗传Swithies和Walker(1955)用凝粉凝胶电泳技术,将HP分为三型:HP1、HP2-1及HP2。用尿素将血清变性处理,再用巯基乙醇还原后进行电泳,可检出6种表型,Hp1S-1S、Hp
3、1S-1F、Hp1F-1F、Hp2-1S、Hp2-1F、Hp2-2。由三个共显性等位基因Hp*1F,Hp*1S,Hp*2所控制。 等电聚焦还可进一步分为10余种表型,由5个共显性等位基因控制 四、四、HpHp的遗传变异的遗传变异 HP0型 用常规检测方法不能检出Hp。血液中无HP,亦称无结合珠蛋白血症 HP2-1M型 电泳谱带特点是HP1和HP2谱带中的快泳动带成分比例增多,而其余谱带非常弱。HPCa型 特征是HP2谱带中快泳动带比例减少,而其余谱带明显增加HPJ-1型 特点是1谱带分裂为两条带,阴极侧的谱带增多,系HP2-1型的变异型。HPK-1型 特点是1区的谱带分裂为两条,其余区域无蛋白
4、带,可能有1型演变而来。其他变异型有:HP2-1(Trans),HP2-1(Haw)等 五、五、HPHP分型原理、方法分型原理、方法 聚丙烯酰胺凝胶电泳(圆盘、垂直板)原理:利用聚丙烯酰胺凝胶(PAG)的分子筛和电场的作用,在凝胶中分离不同型别Hp蛋白。然后利用Hp-Hb复合物中Hb的过氧化物酶活性,使联苯胺氧化成联苯胺蓝。从而使谱带显色进行判型。第二节第二节 维生素维生素D D结合蛋白型结合蛋白型 维生素D结合蛋白(vitamin D blindin protein,DPB)又称型特异性成分(group specific component,GC)属血清2球蛋白Hirschfeld于1959
5、年发现其多态性 主要生物学功能是结合和转运维生素D及其代谢产物。GC可在体内或体外与肌动蛋白(actin)结合,形成1:1的复合物。GC与肌动蛋白结合有利于肌动蛋白从组织中清除。 GC基因定位于第四对染色体长臂(4q12-13) GC系统属常染色体单基因座共显性遗传,按孟德尔定律遗传。 Gc基因全长约42.4kb,包含13个外显子。基因产物为458个氨基酸残基的单一肽链。位于第11外显子中第416位,第420位密码子的变化导致Gc遗传多态性; 常见的等位基因为Gc*2,Gc*1F,Gc*1S。GC遗传及等位基因 Gc表型 聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳技术可将GC分为三种普通表型,即1、21、与2,受
6、控于GC*1与GC*2一对共显性等位基因。用等电聚焦技术可检出3个等位基因产物,共6种常见亚型。即1F、1F1S、1S、2-1F、2-1S与2 法医学应用评价 个人识别率为0.799非父排除率为34.8%室温保存4个月的血痕可检出Gc型 免疫球蛋白同种异型遗传标记免疫球蛋白同种异型遗传标记 同种异型遗传标记是位于免疫球蛋白上具有个体差异的遗传标记 Ig分子免疫学性质 4条多肽链组成并通过二硫键连接的单体,其中两条为重链(H链),两条为轻链(L链)重链分为5类,IgG()、IgA()、IgM()、IgD()、IgE()轻链可分为两型,型和型 免疫球蛋白同种异型的命名与遗传 重链(G1m,G2m,
7、G3m,A2m) G1m(1,2,3,17) G2m(23) G3m(5,14,26,6,15,27,10,16, 28,11,21,13,24) A2m(1,2)轻链(Km) Km (1,2,3)常染色体共显性、呈单倍型遗传 Gm、Km测定血凝抑制试验 酶联免疫抑制法法医学应用评价Gm、Km系统个人识别率及非父排除率高于已知的红细胞血型、红细胞酶型及其他血清型Gm、Km抗原在常温下或碱性环境中颇为稳定,溶血对抗原性无大影响具有较高的法医学应用价值其他血清型1抗胰蛋白酶( 1-AT) 又称蛋白酶抑制物(PI) DP=0.625,EPP=0.231转铁蛋白型(Tf) EPP=0.15670.1803谢谢观看请指导